Luego ingresó a la carrera médica, graduándose en Medicina en el año 1878.
Se graduó con una tesis acerca del tamaño de los glóbulos rojos humanos.
[2] Hasta 1885 estuvo realizando diversos viajes por Europa formándose en bacteriología y farmacología.
[cita requerida] Unos años más tarde, el científico alemán Karl Weigert amplió este descubrimiento añadiendo safranina después del procedimiento de Gram, y observó que algunas bacterias no se teñían y otras se teñían de rojo.
Después un tratamiento con lugol (yodo en yoduro potásico acuoso) y etanol, observando que algunas bacterias retenían el colorante (por ejemplo, los neumococos), mientras que otras no lo hacían.